首页 > CACLP资讯频道 > 企业推荐

手把手教学如何挑选乙肝新指标HBV RNA产品?

2022/11/18 18:14:19 浏览次数:616

中国作为慢性乙肝感染人数第一的乙肝大国,HBV核酸检测在现在及未来很长一段时间都是最大的非新冠核酸市场,而乙肝DNA同质化竞争已非常激烈,在此市场格局下,乙肝新指标HBV RNA或许是进军乙肝核酸检测领域非常好的选择。


全球第一个商品化的HBV RNA检测试剂盒(SAT,RNA捕获探针法)上市已一年有余,如今RT-PCR(PCR-荧光探针法)检测试剂也已上市。买东西都讲究 “货比三家,择优购买”,我们今天就从实际应用角度,来看看该如何选择HBV RNA产品。


选灵敏度高的


众所周知,HBV RNA最早被临床认知的应用场景就是指导安全停药。举个简单的例子,有10位长期接受抗病毒治疗的乙肝患者,患者有停药意向,因而检测HBV RNA评估停药后复发风险。使用普通灵敏度的试剂检测有6位患者HBV RNA阴性,而选择高灵敏度的试剂检测发现其实只有4位患者是阴性,说明普敏检测漏检,出现了假阴性,此时,若选择普通灵敏度试剂的检测结果为标准指导停药,可能会造成2位漏检患者疾病复发。



或许这个故事听起来似曾相识


不错,同样的剧本乙肝普敏DNA和高敏DNA也演绎过。


众所周知,乙肝DNA与肝癌的发生密切相关,而普敏乙肝DNA检测阴性的患者中,仍然有25%的患者发展成为肝癌。



为什么?


这些所谓的“阴性患者”,其实是阳性的,只不过因为乙肝普敏DNA灵敏度不够,不能识别这一群DNA低载量的患者罢了,高敏DNA便在这样的形势下应运而生。而检测灵敏度对于HBV RNA的重要性比DNA更甚,对于经治后的慢乙肝患者HBV RNA载量普遍较低,普通灵敏度的检测产品在评估停药后复发风险方面,非但无法给予临床有效指导,甚至还会误导医生判断,贻误病情或导致疾病复发。



那该如何评估HBV RNA检测产品的灵敏度?


检测下限和定量下限作为衡量灵敏度的标尺,可以作为我们选择产品时的重要依据。


目前市场上两种不同方法学的HBV RNA检测产品中,RT-PCR(PCR-荧光探针法)试剂检测下限为300 copies/mL,SAT(RNA捕获探针法)检测试剂因其独有的检测方法,检测下限为50 copies/mL;从定量范围来看,RT-PCR(PCR-荧光探针法)的定量从1000 copies/mL开始,SAT(RNA捕获探针法)的定量从100 copies/mL开始。由此可见,SAT(RNA捕获探针法)灵敏度更高。


Note

造成灵敏度差异的原因主要是因为DNA酶的使用。RT-PCR只能提取DNA+RNA的混合物,之后需要用DNA酶去除里面的DNA,这个操作步骤既不能保证DNA完全去除干净,同时也会降解掉部分RNA,造成RNA定量不准确。而SAT只特异性提取和扩增RNA,不需要用DNA酶处理,直接定量更精准。


选操作方便的



新冠疫情对检验科的考验巨大,目前医院发热门诊依然需要对所有就诊患者进行新冠病毒核酸检测,并且在短时间内出报告,检验科工作量浩大,人手严重不足。因此要开新项目,人力问题是考量关键。所以操作越简单,人工步骤越少的产品越好,全自动检测的平台将成为分子检测的发展方向。


SAT(RNA捕获探针法)采用的设备自动化程度较高,采血管原管上机,样本进、结果出,全程无人工步骤。RT-PCR(PCR-荧光探针法)一共需要5个步骤,包括核酸提取、DNA酶处理、将处理后的核酸转移至扩增管(需提前人工配制反应试剂)进行扩增、人工判读结果和后续的结果录入,这些都需要人工操作。过多的人工操作,不仅仅在实验流程上显得繁琐,更严重的是会降低实验的可重复性、影响灵敏度,最终影响定量检测结果。


选报告速度快的


大家肯定都有过类似的经历,做的核酸等半天都不出结果。造成这个问题的核心是因为PCR是批处理,攒够一批样本才能上机,因此大家在等核酸的时间,或许大部分都在等“攒样本“。乙肝是个慢性病,患者平时都会去门诊随访,所以最怕检查结果出不来,影响当天配药。RT-PCR(PCR-荧光探针法)这种批处理模式,一般是第二天检测前一天的样本。SAT(RNA捕获探针法)是 ”随到随检“的流水线模式,样本到了即可上机,90分钟就能报告。若有急诊样本,还可以设置”急诊优先“模式,让后上机的样本优先做,灵活性极强。


小结


当前的终端市场尤为关注检测质量及检测效率,在选择HBV RNA检测产品时,首先选择检测灵敏度高、不易漏检的产品,另一方面,选择能够搭载全自动检测平台的产品,它将会成为进军乙肝核酸检测大市场的良好助力。


邮件群发 | Copyright © CACLP体外诊断资讯网 All Rights Reserved. 沪公网安备 31010502005883号 

Powered by 网至普